Ανακοινώθηκε από την EBU η σειρά εμφάνισης των 16 και 17 χωρών που θα εμφανιστούν αντίστοιχα στον Α’ και Β’ Ημιτελικό της 65ης Eurovision. H Stefania θα ερμηνεύσει το "Last Dance" στη σκηνή της Ahoy Arena του Ρότερνταμ στην τέταρτη θέση του Β’ Ημιτελικού, ενώ η Κύπρος θα εμφανιστεί στον Α’ Ημιτελικό στην 8η θέση.
Η σειρά εμφάνισης στον Α’ Ημιτελικό, την Τρίτη 18 Μαΐου 2021:
1. Λιθουανία
2. Σλοβενία
3. Ρωσία
4. Σουηδία
5. Αυστραλία
6. Βόρεια Μακεδονία
7. Ιρλανδία
8. Κύπρος
9. Νορβηγία
10. Κροατία
11. Βέλγιο
12. Ισραήλ
13. Ρουμανία
14. Αζερμπαϊτζάν
15. Ουκρανία
16. Μάλτα
Η σειρά εμφάνισης στον Β’ Ημιτελικό, την Πέμπτη 20 Μαΐου 2021:
1. Σαν Μαρίνο
2. Εσθονία
3. Τσεχία
4. Ελλάδα
5. Αυστρία
6. Πολωνία
7. Μολδαβία
8. Ισλανδία
9. Σερβία
10. Γεωργία
11. Αλβανία
12. Πορτογαλία
13. Βουλγαρία
14. Φινλανδία
15. Λετονία
16. Ελβετία
17. Δανία
Η σειρά εμφάνισης των 26 χωρών στον Μεγάλο Τελικό (δέκα από κάθε ημιτελικό, η "οικοδέσποινα" Ολλανδία και οι Big Five), θα ανακοινωθεί νωρίς το πρωί της Παρασκευής 21 Μαΐου 2021.